PCR, tabi iṣesi pq polymerase, jẹ ilana ti a lo lati mu awọn ilana DNA pọ si.O jẹ idagbasoke akọkọ ni awọn ọdun 1980 nipasẹ Kary Mullis, ẹniti o funni ni ẹbun Nobel ni Kemistri ni ọdun 1993 fun iṣẹ rẹ.PCR ti ṣe iyipada isedale molikula, ti n fun awọn oniwadi laaye lati mu DNA pọ si lati awọn ayẹwo kekere ati ṣe iwadi rẹ ni kikun.
PCR jẹ ilana igbesẹ mẹta ti o waye ni ẹrọ ti o gbona, ẹrọ kan ti o le yi iwọn otutu ti idapọmọra pada ni iyara.Awọn igbesẹ mẹta jẹ denaturation, annealing, ati itẹsiwaju.
Ni ipele akọkọ, denaturation, DNA ti o ni okun meji ni a gbona si iwọn otutu ti o ga (nigbagbogbo ni ayika 95 ° C) lati fọ awọn asopọ hydrogen ti o mu awọn okun meji pọ.Eyi ni abajade ni awọn sẹẹli DNA ti o ni okun meji.
Ni igbesẹ keji, ifarabalẹ, iwọn otutu ti dinku si ayika 55°C lati gba awọn alakoko laaye lati fikun si awọn ilana ibaramu lori DNA oni-okun kan.Awọn alakoko jẹ awọn ege kukuru ti DNA ti o ṣe apẹrẹ lati baamu awọn ilana ti iwulo lori DNA afojusun.
Ni igbesẹ kẹta, itẹsiwaju, iwọn otutu yoo dide si ayika 72°C lati gba Taq polymerase (iru ti DNA polymerase) lati ṣapọpọ okun DNA tuntun lati awọn alakoko.Taq polymerase ti wa lati inu kokoro arun ti o ngbe ni awọn orisun omi gbona ati pe o ni anfani lati koju awọn iwọn otutu giga ti a lo ninu PCR.
Lẹhin iyipo kan ti PCR, abajade jẹ awọn adakọ meji ti ọkọọkan DNA afojusun.Nipa titun awọn igbesẹ mẹta fun nọmba kan ti awọn iyika (eyiti o jẹ 30-40), nọmba awọn ẹda ti ọna DNA afojusun le pọ si ni afikun.Eyi tumọ si pe paapaa iye kekere ti DNA ti o bẹrẹ le jẹ imudara lati gbe awọn miliọnu tabi paapaa awọn ọkẹ àìmọye awọn ẹda jade.
PCR ni awọn ohun elo lọpọlọpọ ni iwadii ati awọn iwadii aisan.O ti wa ni lo ninu awọn Jiini lati iwadi awọn iṣẹ ti awọn Jiini ati awọn iyipada, ni forensics lati itupalẹ DNA eri, ni àkóràn àkóràn okunfa lati ri niwaju pathogens, ati ni prenatal ayẹwo to Iboju fun jiini ségesège ninu awọn ọmọ inu oyun.
PCR tun ti ni atunṣe fun lilo ni nọmba awọn iyatọ, gẹgẹbi PCR pipo (qPCR), eyiti o fun laaye lati ṣe iwọn iye DNA ati yiyipada PCR transcription (RT-PCR), eyiti o le ṣee lo lati mu awọn ilana RNA pọ si.
Pelu ọpọlọpọ awọn ohun elo rẹ, PCR ni awọn idiwọn.O nilo imọ ti ọna ibi-afẹde ati apẹrẹ ti awọn alakoko ti o yẹ, ati pe o le ni itara si aṣiṣe ti awọn ipo iṣesi ko ba ni iṣapeye ni deede.Bibẹẹkọ, pẹlu apẹrẹ adaṣe iṣọra ati ipaniyan, PCR jẹ ọkan ninu awọn irinṣẹ ti o lagbara julọ ni isedale molikula.
Akoko ifiweranṣẹ: Kínní-22-2023